犬瘟如何准确测?
犬瘟热是由犬瘟病毒引起的一种急性高度接触性传染病,常呈败血症症状,感染犬可出现高热、呼吸困难、呕吐腹泻、神经系统失调等,死亡率高。目前对犬瘟尚无有效抗病毒药物,主要以支持疗法和对症治疗为主[1]。
早期发现和治疗是提高犬瘟预后效果的关键。由于缺乏高效价犬瘟检测试剂和特异性血清,临床通常根据流行病学资料、临床症状和病理变化进行初步诊断,再结合实验室检查做出最终诊断。但这种方法的可靠性取决于医师的经验和对疾病特性的了解。建立一套科学准确的诊断方法十分必要。
一、病原学检查 病原学的检查主要是从病料的采集和处理开始。
(一)病料采集 采集的对象主要为精神沉郁、高热、拒食、呕吐、腹泻、全身炎症反应、鼻镜干燥、流鼻涕或鼻涕带血的动物;或者确诊为犬瘟热的动物。
取鼻腔分泌物或咽喉部粘液作涂片,用瑞氏染色剂染色后显微镜检查有无病菌;取肺、肝、脾、淋巴结器官的组织,观察是否有病变及病变特点;
(二)病料处理 用低温超速冷冻法对病料进行处理,以提取DNA。具体操作为将冷冻病料置于液氮中浸泡30min,然后迅速放入研钵中,加生理盐水研磨成匀浆,浸没组织,置于-20℃冰箱中4h以上,使细胞完全破碎,滤过纤维素膜,获得DNA。如果采用高温蒸煮法提取核酸,则可在沸水浴中加热15~20min,放冷后,按上述步骤进行处理。
二、抗体检测 通过检测抗体水平判断动物是否曾经被感染以及感染的类型。
三、病毒分离鉴定 从病料中分离出病毒株,经培养、传代后进行病毒形态学和血清学鉴定,以确认病毒的型别。
四、病毒抗原检测 病毒抗原的检测包括即时检测和免疫学检测。
五、病毒感染细胞系的建立 将病毒接种于原代或传代细胞中,在显微镜下观察病变发生的情况。
六、病毒核酸检测 包括RNA和DNA检测。
七、其他检查 包括心电图、X线、B超等检查,辅助诊断。